第五交响曲，作于1901至1902年，后来又对总谱进行了多次修改。1904年10月18日在科隆的乔尔采尼希演奏会上由马勒指挥首演。第五交响曲重新确立了纯器乐创作的道路，作品中没有运用任何声乐因素。同时各个乐章间的联系更多地依靠音乐自身逻辑的发展，而不是音乐之外的标题因素。
第一乐章 葬礼进行曲，#c小调
含有两个中段。指示为 “以精确的步伐，严格地，像葬礼行列”。以小号表示送葬鼓号的开始，小提琴与大提琴奏出悲哀的主题，然后出现送葬的行列。加快速度后，指示为“热情而粗犷地”，进入降B小调的第一中段，在沉重的音响背景上，小号与小提琴作对位进行。长号奏出鼓号调，在第一段基础上发展得比第一段更激烈。而热情消退，又变成葬礼节奏后，到达A小调第二中段。在进入第二中段之前，独奏中提琴奏马勒自己的《亡儿之歇》中的《在这个世界上的喜悦之光》的旋律。第二中段只是以弦乐进一步宣泄悲哀，悲哀至极，便出现小号的送葬节奏，然后再趋于平静。著名音乐评论家劳伦斯·吉尔曼对这个乐章的解读是：“就像是令人心碎的失去理智的忧愁，一发而不可收拾，在低音提琴和大管的持续低音之上，小号尖厉的音响表现天昏地暗般的悲伤。与弦乐半音进行的哀泣互为呼应，这一段音乐描写绝望之情，汹涌奔腾，前人的音乐中未有可与伦比者。”
第二乐章 a小调，“如暴风雨的激烈，并更加激烈”，奏鸣曲式
在低声部激烈的序奏后，小提琴表现有力而不稳定的第一主题，它的发展加入前乐章的中段动机。第二乐章减慢速度，随着第一乐章的送葬节奏，大提琴给予F小调处理。速度回到原速后，开始发展部。按序奏动机、第一乐章中段旋律、第一主题、第二主题的顺序发展。第一主题变形后成为再现部，第二主题虽给予暗示，但不完全再现。最后边将第一主题作九度音程大跳.边轻轻地结束。
第三乐章 谐谑曲，D大调，指示为“强有力而不太快地”
由木管奏维也纳舞曲的快乐的主题，展开别致的发展后，到达降B大调第一中段，小提琴奏乡村气息的旋律，大提琴给予纠缠。
接着第一段以自由形态再现。第二中段减慢速度，由圆号作引导，各乐器层层发展。第一段三现后，铜管奏第一中段旋律，木管奏第二中段旋律，第二乐章第一主题加入，发展成高潮结束。
第四乐章 稍慢的慢板，三段体，只用竖琴与弦乐
以竖琴伴奏，第一小提琴奏出抒情主题，变成厚重的对位后进入中段，第一小提琴奏躁动不安的旋律。第三段回到F大调，是对第一段的简化。
全乐章只用了弦乐器及竖琴作演奏。在中提琴和竖琴的分解和弦所引领下，第一小提琴奏出第一旋律，并由大提琴再一次奏出。中段旋律亦由第一小提琴奏出，经过三次转调后，乐曲返回最开头的旋律，但改由第二小提琴拉奏。后来第一小提琴紧接，并引领乐团来到结尾的最高潮，然后突然之间，所有声部都收下来，最后以ppp的声量完结。
第五乐章 回旋曲，D大调
圆号与小提琴奏暗示性的有延长记号的单音，转为快板后，管乐奏主题的断奏。接着变成游戏似的快板，圆号奏主题，其它乐器以赋格发展。大提琴奏巴赫风格的第一副主题，也作赋格发展，这一赋格乐段加入了小提琴所奏的优美新旋律。然后主要主题以小提琴开始，以赋格形态再现，接着再现第一副主题，加入了前面优美的动机，表现对位技巧、二重、三重赋格，进入结尾，铜管制造出强烈的对位高潮而结束。
